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QA-bio公司是一家致力于提供糖基化研究工具的專業公司，所提供的糖基化研究產品涵蓋糖苷內/外切酶，去糖基化酶，唾液酸產品，多糖產品純化試劑盒，多糖標記試劑盒，HPLC柱及其緩沖液，同時公司還提供多糖分析服務。此外，公司還提供部分分子生物學產品。

產品線：

碳水化合物分析用的酶
    聚糖標準品
    糖純化
    Ludger Tag聚糖標記試劑盒
    糖生物學用HPLC色譜柱
    糖測序試劑盒

去糖基化試劑盒
    MS / MS數據分析工具

PNGase F

PNGase F從糖蛋白切割N-連接（天冬酰胺連接）寡糖。

0.3單位/ 60 uL 
包括酶，緩沖液，變性劑和Triton-X。

貨號： E-PNG01

肽N糖苷酶F，N-糖苷酶，PNGase F

PNGase F從糖蛋白切割N-連接（天冬酰胺連接）寡糖。PNGase F將天冬酰胺分解成天冬氨酸，保留寡糖。變性會使裂解率提高到100倍。大多數天然蛋白質仍然可以*N-去糖基化，但是孵育時間必須增加。PNGase F將在孵育條件下保持活性至少72小時。PNGase F不會去除在植物糖蛋白上通常發現的含有α-（1,3）連接的核心巖藻糖的寡糖; 為此，使用肽N-糖苷酶A.

來源 Elizabethkingia miricola（是Chryseobacterium meningosepticum）

EC 3.5.1.52

內容物將
60μl等份的PNGase F（0.3U）在20mM Tris-HCl，pH7.5中

5×反應緩沖液7.5，用于PNGase F - 250mM磷酸鈉，pH7.5

變性溶液 - 2％SDS，1Mβ-巰基乙醇

Triton X-100 - 15％溶液

比活性 > 25 U / mg

活性 5 U / ml

分子量 36,000道爾頓

PNGase F 6-10的pH范圍，*7.5

PNGase F建議用法
1.加入200μg糖蛋白至Eppendorf管。用去離子水調節至35μl終體積。
2.加入10μl5x PNGase F反應緩沖液7.5和2.5μlPNGase F變性溶液。在100°C下加熱5分鐘。
酷。加入2.5μlPNGase F Triton X-100并混合。
4.向反應物中加入2.0μlPNGase F。在37°C孵育3小時。

特異性切除所有天冬酰胺連接的復合物，高甘露糖寡糖，除非alpha（1-3）核心巖藻糖基化; 天冬酰胺必須在兩個末端都有肽鍵，Endo F自由

比活性定義為在37℃，pH7.5下在1分鐘內催化從1微摩爾變性的BSA和RNA酶B中釋放N-連接的寡糖所需的酶量。裂解通過SDS-PAGE（切割的RNA酶B遷移更快）來監測。

儲存酶在4°C。

PNGase F參考

- 拜耳，EA，F. De Meester，T. Kulik和M. Wilchek。去糖基化蛋白抗生物素蛋白的制備 Appl Biochem Biotech 53： 1-9（1995）

- 長老，JH和S.亞歷山大。內切-BN-乙酰氨基葡萄糖苷酶F：來自腦膜炎桿菌的內切糖苷酶，其切割高甘露糖和復合糖蛋白。Proc Natl Acad Sci USA 79： 4540-4544（1982）

- Tarentino，A .L.，CMGomez和TH Plummer，Jr.Depososylation of asparagine-linked glycans by peptide：N-glycosidaseF.Biochemistry 24： 4665-4671（1985）

- Tarentino AL和TH Plummer。天冬酰胺連接的聚糖的酶解脫糖基化：來自腦膜炎黃桿菌的寡糖切割酶的純化，性質和特異性。Meth Enzymol 230： 44-57（1994）

- Trimble RB和AL Tarentino。鑒定腦膜炎黃桿菌中不同的糖苷內切酶（endo）活性：內源F1，endo F2和endo F3。Endo F1和endo H僅水解高甘露糖和雜聚糖。J Biol Chem 266： 1646-1651（1991）

- Taga，EM，A. Waheed和RL Van Etten。來自杏仁的均一肽-N-糖苷酶的結構和化學表征。Biochemistry 23： 815-22（1984）

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