immunochemistry 9161說明書

ImmunoChemistry Technologies由四個管理合伙人于1994年成立，現(xiàn)已發(fā)展成為一家強大的企業(yè)，擁有國際分銷商網(wǎng)絡以及在世界各地的生物醫(yī)學研究實驗室工作的忠實且不斷擴大的客戶群。

ICT最初是作為一家專注于定制免疫分析開發(fā)和ELISA試劑的合同實驗室后，于1999年擴展了其產(chǎn)品線。當時，該公司開發(fā)了用于細胞死亡和相關基礎研究領域的檢測試劑。如今，ICT已經(jīng)有40多家分銷商在全球范圍內(nèi)銷售這些產(chǎn)品。

FAMFLICA®Caspase-1（WEHD）檢測試劑盒

$ 211.00 – $ 592.00

胱天蛋白酶在細胞凋亡和炎癥中起重要作用。研究人員使用ICT的FLICA檢測試劑盒，以通過胱天蛋白酶在培養(yǎng)的細胞和組織中定量凋亡的方法。FAM FLICA Caspase-1探針使研究人員能夠評估caspase-1的激活。

FLICA試劑FAM-WEHD-FMK進入每個細胞，并與激活的caspase-1不可逆地結合。由于FAM-WEHD-FMK FLICA試劑與活性酶共價偶聯(lián)，因此保留在細胞內(nèi)，而任何未結合的FAM-WEHD-FMK FLICA試劑則擴散出細胞并被沖洗掉。剩余的綠色熒光信號是添加試劑時細胞中存在的活性caspase-1酶活性的直接量度。包含結合的FLICA的細胞可以通過熒光酶標儀，熒光顯微鏡或流式細胞儀進行分析。可以立即讀取用FLICA試劑標記的細胞，或使用試劑盒中包含的固定劑保存16小時。未固定的樣品也可以分別用碘化丙錠或Hoechst 33342進行分析，以檢測壞死或核形態(tài)的變化。

 1.準備樣品和對照
2.用diH 2 0稀釋10X細胞凋亡洗滌緩沖液1:10。3 
.用50μLDMSO稀釋FLICA 。
4.加入200μLPBS稀釋FLICA 1：5。
5.以1:30的比例將稀釋的FLICA加到每個樣品中（例如，在290μL的培養(yǎng)細胞中添加10μL）。
6.孵育大約1小時。
7.取出培養(yǎng)基并洗滌細胞3次：添加1X細胞凋亡洗滌緩沖液并旋轉細胞。
8.如果需要，用其他污漬標記，例如Hoechst，碘化丙啶，7-AAD或抗體。
9.如果需要，固定單元格。
10.用熒光顯微鏡，熒光板讀數(shù)器或流式細胞儀進行分析。FAM-FLICA在492 nm處激發(fā)，并在520 nm處發(fā)射。

ICT的FAM-FLICA Caspase-1（WEHD）試劑盒（＃9162）用于檢測THP-1單核細胞的凋亡。用FAM-WEHD-FMK標記細胞，先用陰性對照（DMSO）或LPS（1 µg / mL，3小時）處理，再用尼古丁（20 µM，30分鐘）處理，以誘導細胞凋亡。處理后，將細胞洗滌并重懸于PBS + 0.5％BSA中。然后將細胞用Hoechst 33342染色，固定并使用配備了EGFP（Ex 470/30，Em 530/50）和DAPI（Ex 375/28，Em 460/50）LED的Logos iRiS數(shù)字細胞成像系統(tǒng)進行觀察以20倍的尺寸過濾立方體。與DMSO模擬處理的細胞（下部的圖像）相比，在LPS +尼日利亞霉素處理的細胞（上部的圖像）中觀察到綠色FAM-FLICA染色水平升高（最左側的圖像）。還顯示了Hoechst 33342染色（中間圖像）以及EGFP和DAPI通道的覆蓋圖（最右邊的圖像）。

 •試劑名稱：FAM-WEHD-FMK 
•目標：Caspase-1 
•激發(fā)/發(fā)射：492 nm / 520 nm 
•分析方法：流式細胞儀，熒光顯微鏡，熒光板讀數(shù)器
•樣品類型：細胞培養(yǎng)
•儲存：2 -8°C 
•運送：過夜（國內(nèi)）運送，國際優(yōu)先運送

試劑盒9161：25個測試
•FLICA Caspase-1試劑（FAM-WEHD-FMK），1小瓶，＃6708 
•10X細胞凋亡洗滌緩沖液，15 mL，＃635 
•固定劑，6 mL，＃636 
•碘化丙錠，1 mL， ＃638 
•Hoechst 33342，1 mL，＃639 
•試劑盒手冊

試劑盒9162：100個測試
•FLICA Caspase-1試劑（FAM-WEHD-FMK），4個樣品瓶，＃6708 
•10X細胞凋亡洗滌緩沖液，60 mL，＃634 
•固定劑，6 mL，＃636 
•碘化丙錠，1 mL， ＃638 
•Hoechst 33342，1 mL，＃639 
•試劑盒手冊