Cytoskeleton BK163-S說明書

更新時間：2019-02-18

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Cytoskeleton，Inc。成立于1993年。從一開始我們就不斷擴展我們的產品線。

Cytoskeleton，Inc。很高興為藥物篩選，信號轉導和細胞骨架研究提供廣泛的試劑盒和產品。我們專注于生產純化蛋白質和易于使用的試劑盒，以研究生物化學和細胞過程。我們的試劑盒可用于少量樣品，用于基礎研究或小屏幕（Biochem Kits™），也可用于大屏幕的高通量樣品（CytoDYNAMIX Screens™）。

除了我們現(xiàn)有的產品，我們還在產品線中為微管，微管蛋白，運動蛋白，小G蛋白效應物，GAP，GEF和其他幾種蛋白提供藥物篩選服務。

Cytoskeleton BK163-S說明書

Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒（10次檢測）

量

10種檢測方法（Cat。＃BK163-S）

Signal-Seeker™系列產品的開發(fā)旨在簡化專家和非專業(yè)人士對關鍵調節(jié)蛋白修飾的分析。全面的Signal-Seeker™試劑盒提供親和珠系統(tǒng)，可從任何給定的細胞或組織裂解液中分離和富集修飾的蛋白質。然后使用針對靶蛋白的抗體通過標準蛋白質印跡程序分析富集的蛋白質群體。

產品用途包括

調查瞬態(tài)監(jiān)管機制
測量多種途徑成員蛋白的信號傳導事件
發(fā)現(xiàn)您感興趣的蛋白質的新修改
深入了解監(jiān)管機制
測量內源性或瞬時表達的蛋白質信號傳導事件

套件內容

乙酰賴氨酸試劑盒包含以下組分：

裂解和蛋白質定量步驟

IP和預清除步驟

洗步驟

洗脫步驟

西部一步

BlastR™裂解緩沖液

BlastR™稀釋緩沖液

BlastR™過濾器

蛋白酶抑制劑雞尾酒

HDAC抑制劑雞尾酒

Precision Red™蛋白質分析試劑

乙酰賴氨酸親和珠

IP控制珠

BlastR™洗滌緩沖液

旋轉列

珠子洗脫緩沖液

化學發(fā)光試劑A.

化學發(fā)光試劑B.

抗乙酰賴氨酸-HRP抗體

示例結果

這些套件有很多應用，這里我們描述一個有趣的例子：

應用1：調查顯著的乙?；录?/span>

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒進行免疫沉淀，與細胞信號傳導乙酰賴氨酸抗體和免疫組化乙酰賴氨酸親和珠相比較

圖1.各種乙?；?- 賴氨酸親和試劑用于來自Cos-7細胞的IP乙酰化蛋白質，用TSA（1m M）和煙酰胺（1mM）處理（+）或未處理（ - ）6小時。（1）16.7 米 AAC04珠漿液（20升米克抗體）。（2）50 米 AAC04珠漿液（60升米克抗體）。（3）抗乙酰賴氨酸兔單克隆混合物（Cell Signaling，按制造商的說明書1：100）。（4）乙酰ImmuneChem賴氨酸親和力珠（40 米克抗體）。（5）ImmunChem乙酰賴氨酸珠（80 米克抗體）。（6）正常小鼠IgG對照珠（60 米g抗體）。洗脫富集的乙酰化蛋白質的總曲線，并通過蛋白質印跡用AAC03-HRP抗體（1：3000）分析。AAC04在富集廣泛的乙?；鞍踪|方面表現(xiàn)出色，而其他商業(yè)乙酰賴氨酸富集試劑主要富集豐富的乙?；鞍踪|（例如乙?；⒐艿鞍缀徒M蛋白）。

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒免疫沉淀靶特異性乙酰化蛋白

圖2A：使用BlastR緩沖液分離A431細胞，未處理（ - ）或用1m M TSA和1mM煙酰胺處理（+）6小時。使用AAC04珠（60m g）進行IP 。通過SDS-PAGE分離總細胞裂解物（輸入）和免疫沉淀的樣品，并通過蛋白質印跡用針對EGFR的抗體（Millipore，1：1000），Hsp90（Abcam，1：20,000），P53（Sigma，1：2000）進行分析，和RhoDGI（Millipore，1：1000）

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒從肝臟和心臟組織中免疫沉淀乙?；鞍?/strong>

圖2B：用BlastR緩沖液獲得小鼠組織提取物（肝臟和心臟）。使用AAC04珠（60，進行IP 米 g）或mIgG對照珠（＃CIG02，60 米在組織提取物的1mg的克）。通過SDS-PAGE分離富集的蛋白質，并通過蛋白質印跡用AAC03-HRP（1：3000）分析。

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