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技術(shù)文章

Technical articles

當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章C3a 過(guò)敏毒素

C3a 過(guò)敏毒素

更新時(shí)間:2018-06-23點(diǎn)擊次數(shù):2640

 

上海起發(fā)為complementtech一級(jí)經(jīng)銷商,Complement Technology,Inc.于2005年成立.CompTech于2005年收購(gòu)Advanced Research TechnologiesComplement Technology繼續(xù)為世界各地的科學(xué)家提供高質(zhì)量的試劑,并在我們的清單中增加了許多新試劑。我們盡力為您的應(yīng)用提供宜試劑和使用我們補(bǔ)充試劑的宜建議。  

名稱: C3a 過(guò)敏毒素  (不是重組的)C3a Anaphylatoxin (Not Recombinant)

目錄號(hào):      A118

可用尺寸:          50微克

濃度:           0.5 mg / mL (見(jiàn)實(shí)際濃度分析證書(shū))

滅絕 科夫。        阿 276 納米=  0.41以1.0毫克/毫升

分子量:      9089Da(單鏈)

形式:                          冷凍液體

純度:                         SDS-PAGE> 97%

緩沖液:                        磷酸鹽緩沖鹽水,pH 7.3(不加載體蛋白質(zhì))

防腐劑               無(wú)

存在的障礙:  <3%

存儲(chǔ):                      -70 Ò C或以下。  避免凍結(jié)/解凍。

資源:                       正常 人血清(通過(guò)認(rèn)證測(cè)試顯示為陰性

                                    對(duì)于 HBsAg,HTLV-I / II,STS以及針對(duì)HCV,HIV-1的抗體

                                    和 HIV-II)。

預(yù)防措施:               使用正常的預(yù)防措施處理人體血液制品。

產(chǎn)地:                        制造在美國(guó)。

 

一般描述

            天然人C3a通過(guò)人C3轉(zhuǎn)化酶切割人C3蛋白來(lái)制備。   C3a是由補(bǔ)體活化產(chǎn)生的三種蛋白質(zhì)(C3a,C4a和C)的過(guò)敏毒素家族的成員。  它是一種含有77個(gè)氨基酸的非糖基化多肽,分子量為9,089道爾頓。  C3a的許多生物功能與C的生物功能相似,但C3a比C每微克活性低約10至20倍。C3a介導(dǎo)許多炎癥反應(yīng),包括平滑肌收縮,血管舒張,血管通透性增加以及肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞釋放組胺(Law,SKA和Reid,KBM(1995))。   與C相比,C3a不表現(xiàn)出顯著的嗜中性粒細(xì)胞刺激活性,并且不誘導(dǎo)趨化性,顆粒釋放或超氧化物產(chǎn)生。  C3a通過(guò)作為廣泛分布于外周組織,淋巴細(xì)胞(neutrohphils, monocyes和嗜酸性粒細(xì)胞)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)(星形膠質(zhì)細(xì)胞,神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞)中的G蛋白偶聯(lián)受體C3a受體(C3aR),SKA和Reid,KBM(1995))。  C3a的這些活性通過(guò)去除C-末端精氨酸而失活,并且由于羧肽酶N(Meuller)的作用在血漿中迅速發(fā)生-Ortiz,SL等人。(2009))。

 

物理特性和結(jié)構(gòu)

            分子量:  9,089計(jì)算分子量。  觀測(cè)質(zhì)量(MALDI-TOF)為9092 + 9個(gè)質(zhì)量單位。

            氨基酸序列(77個(gè)氨基酸):SVQLTEKRMD KVGKYPKELR KCCEDGMREN PMRFSCQRRT RFISLGEACK KVFLDCCNYI RRQHARA SHLGLAR              

X射線衍生的晶體結(jié)構(gòu):  Huber,R。等人 (1980年) 

NMR衍生 結(jié)構(gòu):Nettesheim,DG等。(1988); Murray,I.et al。(1999年)。 

 

功能

            參見(jiàn)上面的一般描述。  盡管C3a具有一些可測(cè)量的趨化活性,但在這方面其活性比C低數(shù)百倍。  由于這些差異,C3a在這種反應(yīng)中的作用被認(rèn)為在體內(nèi)是可以忽略 。   然而,考慮到在補(bǔ)體激活期間通常產(chǎn)生比C多數(shù)百倍的C3a,尤其是通過(guò)替代途徑激活,這種信念可能不*正確(參見(jiàn)以下標(biāo)題為體內(nèi)調(diào)節(jié)的部分)。  通常一起釋放的C3a和C都可引起過(guò)敏性疾病 休克是一種類似于由強(qiáng)烈的過(guò)敏反應(yīng)引起的廣泛循環(huán)衰竭。 

 

測(cè)定

            C3a(和C)功能活性的兩種確定的測(cè)定包括誘導(dǎo)豚鼠回腸的收縮和染料如臺(tái)盼藍(lán)從脈管系統(tǒng)滲入皮膚。  的過(guò)敏毒素 也誘導(dǎo)肥大細(xì)胞脫粒,(如組胺釋放測(cè)定),血小板聚集,從IL-1釋放的單核細(xì)胞 和前列腺素和釋放白三烯 從許多細(xì)胞和組織。

            更實(shí)際的測(cè)定法包括從豚鼠血小板釋放ATP,從豚鼠血小板釋放5-羥色胺再釋放酶,從分化的U937細(xì)胞釋放N-乙酰-β-D- 葡糖酰胺酶和從分化的U937細(xì)胞釋放鈣。  已經(jīng)詳細(xì)描述了這些測(cè)定(Dodds,AW和Sim,RB(1997))。 

            許多公司出售用于測(cè)定血液和其他液體中的C3a水平(或更準(zhǔn)確地說(shuō),C3a去飽和水平)的ELISA試劑盒。  C3a / C3a desArg的放射免疫分析也可用。  這些測(cè)量對(duì)于檢測(cè)體內(nèi)補(bǔ)體激活是有用的,但是由于過(guò)敏毒素的清除速度很快,其含義的解釋變得復(fù)雜。 

 

體內(nèi)

            新鮮抽取的人正常血清中含有大約17 納米 的C3a(對(duì)應(yīng)于總C3的約0.3%活化)。  盡管這可能代表體內(nèi)的靜息濃度沒(méi)有一些C3激活的情況下很難抽取或儲(chǔ)存血液,因此真正的體內(nèi)濃度難以確定。收集管  中EDTA和Futhan的存在可以使該背景zui小化(Pfeifer,PH等(1999))。  在血液所有C3的*活化(1200微克/ 毫升)將導(dǎo)致?6600 納米的C3a (?60微克/ 毫升)。  由于許多C3a反應(yīng)的敏感性和血液中C3比C5多20倍的事實(shí),理論上可以 通過(guò)在局部區(qū)域中激活大約1 / 10,000的C3 來(lái)啟動(dòng)生物反應(yīng)。

 

規(guī)

            C3a水平由三個(gè)過(guò)程調(diào)控:形成,失活和清除。切割C3和釋放C3a的酶(統(tǒng)稱為C3 / C5轉(zhuǎn)化酶)的速率約為這些酶切割C5的速率的300倍(Pangburn,MK和Müller-Eberhard,HJ(1986); Rawal,N.和Pangburn,MK(2001))。  因此,盡管C3a對(duì)于大多數(shù)生物活動(dòng)而言比C活性低10至20倍(參見(jiàn)上面的一般性描述),但C3a的產(chǎn)生速度要快得多。   C3a通過(guò)去除其C-末端精氨酸氨基酸而“失活”。  通過(guò)血漿酶羧肽酶N(Mueller-Ortiz SL et al。(2009))的作用產(chǎn)生產(chǎn)物C3a desArg(或沒(méi)有C端精氨酸的C3a)。  滅活很快,大部分C3a在其形成幾分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化為C3a desArg。“滅活的”C3a仍具有一些生物學(xué)活性,但被認(rèn)為對(duì)大多數(shù)C3a特異性功能無(wú)效。 然而,C3a desArg具有其自身的許多活性,包括鑒定為由脂肪組織釋放的酰化刺激蛋白(ASP)。  歸因于C3a desArg的此功能通過(guò)受體C5L2控制脂質(zhì)代謝(參見(jiàn)C3a desArg產(chǎn)品說(shuō)明)。  由于大量攜帶C3a受體的細(xì)胞(內(nèi)皮細(xì)胞,免疫細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞,神經(jīng)元等),C3a和C3a desArg的捕獲,內(nèi)化和消化導(dǎo)致其從循環(huán)中移除。

 

不足之處

            缺乏C3或缺少切割C3以產(chǎn)生C3a的酶的缺陷導(dǎo)致不存在C3a。  沒(méi)有已知的所有C3轉(zhuǎn)化酶的*缺陷。  存在C3缺陷型人(Ghannam A等(2008))和小鼠(Wessels,MR等(1995))的實(shí)例,但與C3缺陷相關(guān)的病理學(xué)程度是由于缺乏C3或缺少C3a尚不清楚。  有關(guān)這方面的信息已經(jīng)從C3aR敲除動(dòng)物獲得(Singer,L.et al。(1994))。  C3缺陷導(dǎo)致對(duì)化膿 性感染的易感性增加, B細(xì)胞和T細(xì)胞系統(tǒng)對(duì)膜性增生的適應(yīng)性免疫反應(yīng)嚴(yán)重降低 腎小球腎炎和SLE。  C3aR KO小鼠表明這些效應(yīng)的一部分是由于C3缺失中C3a的丟失所致。

 

疾病

            參見(jiàn)上文關(guān)于許多疾病和過(guò)敏性休克中與炎性反應(yīng)有關(guān)的C3a的許多生物學(xué)作用。  此外,C3a在哮喘中的作用已有詳細(xì)記載(Zhang,X。和Kohl,J。(2010); Wills-Karp,M。(2007))。

 

注意事項(xiàng)/毒性/危險(xiǎn)

            C3a的來(lái)源是人血清,因此即使HBsAg,HTLV-I / II,STS以及HCV,HIV-1和HIV-II抗體經(jīng)過(guò)認(rèn)證測(cè)試顯示其來(lái)源為陰性,也必須采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施。

            注射會(huì)引起過(guò)敏性休克,這是一種類似于由過(guò)敏反應(yīng)引起的廣泛循環(huán)衰竭。

            危險(xiǎn)代碼:B            WGK德國(guó) 3

            MSDS可根據(jù)要求提供。

 

參考

Dodds,AW和Sim,RB編輯(1997年)補(bǔ)充。實(shí)用方法(ISBN 019963539)牛津 大學(xué) 按, 牛津。

 

Ghannam A,Pernollet 男,F(xiàn)auquert JL,Monnier的 N,Ponard d,維利爾斯MB,Péguet -Navarro?,特里東 A,盧納爾迪 ?,Gerlier d,杜洛埃 C.(2008)與相關(guān)聯(lián)的損傷人類C3不足樹(shù)突 細(xì)胞分化,存儲(chǔ)器B細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。J Immunol。181:5158-5166。

 

Huber,R.,Scholze,H.,Paques,EP和Deisenhofer,J.(1980)水晶人類C3a 過(guò)敏毒素的結(jié)構(gòu)分析和分子模型。 Hoppe Seylers Z Physiol Chem 361:1389-1399。

 

Hugli,TE,Gerard,C.,Kawahara,M., Scheetz, 我第二,Barton,R.,Briggs,S.,Koppel,G。和Russell,S。從補(bǔ)體激活的人血清中分離三種單獨(dú)的過(guò)敏毒素。 (1981)Mol。細(xì)胞。 Biochem。 41,59-66。

 

Law,SKA和Reid,KBM(1995)Complement 2nd Edition(ISBN )牛津 大學(xué) 按, 牛津。

 

Mealler -Ortiz,SL,Wang,D。,Morales JE,L??i,L.,Chang,JY。和Wetsel,RA(2009)Targeted disruption of the gene encoding the murine small subunit of carboxypeptidase N(CPN1) C 過(guò)敏毒素介導(dǎo)的休克。(2009)J.Immunol。182:6533-6539。

 

穆雷, 一世。科爾,J。和Cianflone,K。(1999)酰化 -stimulating蛋白(ASP):細(xì)胞表面結(jié)合和結(jié)構(gòu)-功能決定簇的三酰基甘油合成的活性。Biochem J.342:41-48。

 

Nettesheim,DG,Edalji,RP,Mollison,KW,Greer,J。和Zuiderweg,ER(1988) 通過(guò)NMR光譜測(cè)定溶液中補(bǔ)體成分C3a 過(guò)敏毒素的二級(jí)結(jié)構(gòu):晶體和溶液構(gòu)象之間的差異Proc Natl Acad Sci USA 85 :5036-5040

 

Pangburn,MK和Müller-Eberhard,HJ(1986)人補(bǔ)體旁路途徑的C3轉(zhuǎn)化酶。 雙分子蛋白酶的酶學(xué)性質(zhì)。

Biochem J.235:723-730

 

Pfeifer,PH,Kawahara,MS和Hugli,TE(1999)血液和血漿樣品中體外補(bǔ)體激活的可能機(jī)制:futhan / EDTA對(duì)照體外補(bǔ)體激活。Clin Chem。45:1190至99年。

 

Rawal,N。和Pangburn,MK(2001)形成補(bǔ)體旁路途徑的高親和力C5 轉(zhuǎn)化酶。  J. Immunol。166:2635-2642。

 

Singer,L.,Colten HR和Wetsel,RA(1994)補(bǔ)體C3不足:人類,動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)。Pathobiology 62:14-28。

 

Wessels,MR,Butko,P.,Warren,HB,Lage,AL和Carroll,MC(1995)補(bǔ)體C3或C4缺陷小鼠中B組鏈球菌感染的研究表明補(bǔ)體在天然和獲得性免疫中的重要作用。Proc Natl Acad Sci 美國(guó) 92:11490-11494。

 

Wills-Karp,M。(2007)Complement activation pathways:a bridge between innate and adaptive immune responses in asthma。Proc Am Thorac Soc 4:247-251。

 

Zhang,X。和Kohl,J。(2010)A complex role for complement in allergic asthma。Expert Rev Clin Immunol 6:269-277。

 

僅供研究使用。

不適用于人類或藥物使用。

 

 

complementtech產(chǎn)品目錄:

 

貨號(hào)

品名

規(guī)格 

目錄價(jià)

品牌

A098

C1

200µg

3400

complementtech

A099

C1q

1000µg

3162

complementtech

A100

C1q (40% Glycerol)

1000µg

3162

complementtech

A102

C1r Enzyme

250µg

3417

complementtech

A103

C1s Proenzyme

250µg

3366

complementtech

A104

C1s Enzyme

250µg

3281

complementtech

A140

C1 Esterase Inhibitor

1000µg

3468

complementtech

A112

C2

50µg

3298

complementtech

A113

C3

250µg

2482

complementtech

A113c

C3 (concentrated)

1000µg

7327

complementtech

A118

C3a

50µg

3162

complementtech

A119

C3a desArg

50µg

3043

complementtech

A114

C3b

250µg

3094

complementtech

A115

iC3b

250µg

3417

complementtech

A116

C3c

250µg

3706

complementtech

A117

C3d

100µg

3825

complementtech

A105

C4

250µg

3468

complementtech

A105c

C4 (concentrated)

1000µg

8245

complementtech

A106

C4a

50µg

4114

complementtech

A107

C4a desArg

50µg

4114

complementtech

A108

C4b

250µg

2992

complementtech

A109

C4b Binding Protein

250µg

4131

complementtech

A120

C5

250µg

3570

complementtech

A144

C

30µg

6188

complementtech

A144(300)

C

300µg

詢價(jià)

complementtech

A145

C desArg

50µg

4301

complementtech

A122

C5b,6

50µg

3468

complementtech

A123

C6

250µg

3366

complementtech

A124

C7

250µg

3366

complementtech

A125

C8

250µg

3536

complementtech

A126

C9

250µg

3366

complementtech

A127

SC5b-9 Complex

100µg

2992

complementtech

A135

Factor B

250µg

3213

complementtech

A136

Factor D

25µg

3417

complementtech

A137

Factor H

250µg

2958

complementtech

A137c

Factor H (conc.)

10000µg

詢價(jià)

complementtech

A138

Factor I

100µg

3366

complementtech

A139

Factor P

100µg

3468

complementtech

A150

Cobra Venom Factor  (USA ONLY)

1000µg

3298

complementtech

A154

Factor Ba

100µg

3298

complementtech

A155

Factor Bb

250µg

6188

complementtech

A118

C3a

50µg

3162

complementtech

A119

C3a desArg

50µg

3043

complementtech

A106

C4a

50µg

4114

complementtech

A107

C4a desArg

50µg

4114

complementtech

A144

C

30µg

6188

complementtech

A144(300)

C

300µg

詢價(jià)

complementtech

A145

C desArg

50µg

4301

complementtech

A300

C1q-Dpl

1ml

2074

complementtech

A312

C2-Dpl

1ml

2074

complementtech

A314

C3-Dpl

1ml

2482

complementtech

A305

C4-Deficient Guinea Pig

1ml

2448

complementtech

A308

C4-Dpl           

1ml

2482

complementtech

A320

C5-Dpl

1ml

2125

complementtech

A323

C6-Dpl

1ml

2040

complementtech

A324

C7-Dpl

1ml

2074

complementtech

A325

C8-Dpl

1ml

2074

complementtech

A326

C9-Dpl

1ml

2074

complementtech

A335

Factor B-Dpl

1ml

2074

complementtech

A336

Factor D-Dpl   

1ml

2074

complementtech

A337

Factor H-Dpl

1ml

2686

complementtech

A338

Factor I-Dpl    

1ml

2482

complementtech

A339

Factor P-Dpl

1ml

2482

complementtech

A340

C3/C4 Inactivated Serum

1ml

2074

complementtech

A399

C1q/Factor D-Dpl  

1ml

2856

complementtech

A200

Goat Anti-Human C1q     

1ml

1054

complementtech

A212

Goat Anti-Human C2

1ml

2329

complementtech

A213

Goat Anti-Human C3

1ml

1054

complementtech

A218

Rabbit Anti-Human C3a

1ml

2550

complementtech

A205

Goat Anti-Human C4

1ml

1054

complementtech

A206

Rabbit Anti-Human C4a

1ml

2550

complementtech

A220

Goat Anti-Human C5

1ml

1275

complementtech

A221

Rabbit Anti-Human rC

1ml

2550

complementtech

A223

Goat Anti-Human C6

1ml

1275

complementtech

A224

Goat Anti-Human C7

1ml

1275

complementtech

A225

Goat Anti-Human C8

1ml

1275

complementtech

A226

Goat Anti-Human C9

1ml

1275

complementtech

A227

Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG)

0.2ml

2584

complementtech

A235

Goat Anti-Human Factor B

1ml

1275

complementtech

A236

Goat Anti-Human Factor D

1ml

2499

complementtech

A237

Goat Anti-Human Factor H

1ml

1275

complementtech

A238

Goat Anti-Human Factor I

1ml

1309

complementtech

A239

Goat Anti-Human Factor P

1ml

1462

complementtech

A240

Goat Anti-Human C1-INH        

1ml

1173

complementtech

A260

Rabbit Anti-Human Vitronectin

1ml

1445

complementtech

NHS

Human Serum

1ml

578

complementtech

GPS

Guinea Pig Serum

1ml

714

complementtech

NRS

Rat Serum

1ml

901

complementtech

NMS

Mouse Serum   

1ml

1309

complementtech

B102

GVB++ (with Ca and Mg)

250ml

1224

complementtech

B100

GVB++ (with Ca and Mg)

1 Liter

3264

complementtech

B103

GVB° (without Ca and Mg)

250ml

1224

complementtech

B101

GVB° (without Ca and Mg)

1 Liter

3264

complementtech

B104

GVBE (with EDTA)

250ml

1224

complementtech

B105

GVBE (with EDTA)

1 Liter

3264

complementtech

B110

SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

250ml

1870

complementtech

B111

SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

1 Liter

5066

complementtech

B112

VBS++ (with Ca and Mg)

250ml

1224

complementtech

B113

VBS++ (with Ca and Mg)

1 Liter

3264

complementtech

B200

EA (Ab-sensitized sheep E)

5ml @ 5x108/ml

3043

complementtech

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B202

EA (Ab-sensitized sheep E)

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B210

Es (sheep E)

20ml @ 5x108/ml

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B300

Er (rabbit E)

5ml @ 5x108/ml

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B301

Er (rabbit E)

10ml @ 5x108/ml

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B302

Er (rabbit E)

20ml @ 5x108/ml

3893

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B400

Zymosan (preactivated)

10ml @ 1x109/ml

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MgEGTA

10ml @ 0.1M

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Hemolysin

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